GFP標(biāo)記到表達(dá)的煙草葉片為什么有紅色熒光矿瘦?
經(jīng)常有同學(xué)咨詢,我用LUYOR-3415RG GFP便攜式雙波長熒光蛋白激發(fā)光源觀察GFP才煙草葉片的表達(dá)愿卒,為什么會有紅色熒光缚去,有的是整片葉片都是紅色熒光,有的有綠色熒光表達(dá)琼开,也有紅色熒光易结,究竟是什么原因,現(xiàn)在柜候,我們給大家解釋說明一下:
因?yàn)楦愣瑹煵萑~片含有大量的葉綠素,葉綠素在藍(lán)色波段照射時候渣刷,會發(fā)出紅色熒光鹦肿。具體葉綠素的激發(fā)光和發(fā)射光的光譜圖如下:
由上圖可以看出,葉綠素a和葉綠素b的激發(fā)波段400-500nm辅柴。主峰在460nm箩溃,屬于藍(lán)光,發(fā)射波段為620-680nm碌嘀,屬于紅光波段涣旨。
所以,如果用LUYOR-3415RG照射煙草葉片筏餐,如果葉片沒有表達(dá)GFP或者GFP表達(dá)量太低,會看到整個葉片都是紅色牡拇。如果葉片上有很高的GFP表達(dá)魁瞪,在葉片表達(dá)的位置會有綠色熒光穆律。見下圖:
如果您不希望看到葉綠素紅色熒光,您可以選擇LUV-30AG綠色觀察眼鏡导俘,這款熒光蛋白觀察眼鏡采用帶通隔離峦耘,能夠隔離500nm以下和580nm以上的波段,這樣就看不到葉綠素的紅色熒光旅薄。拍照可以選擇LUV-520A拍照濾鏡辅髓,這款拍照濾鏡,也是采用帶通濾光片少梁,有效隔離掉了葉綠素的紅色熒光洛口,您可以參考閱讀《如果選購熒光蛋白拍照濾鏡 》LUV-30AG和luv-520a的觀察、拍照效果如下:
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